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针对2D胶粒的MALDI-TOF/TOF质谱鉴定

来源:奔驰糖果派对攻略 作者:生物质谱实验室 时间:2009-04-21 点击:

  MALDE-TOF/TOF MS以其快速、准确、灵敏而成为蛋白质组学主要的分析技术,它根据蛋白质酶解后的肽质量指纹谱和肽序列信息去搜索蛋白质或核酸序列库以鉴定蛋白质。

  BPRC生物质谱实验室是专门从事生物质谱研究的国家重点实验室,拥有先进的MALDI4800质谱设备和特色的科研技术,能够高质、快速的完成规模化的质谱鉴定工作。

技术咨询电话: 80705177、80727777-1132
针对大批量质谱分析或签订长期技术服务合同的客户实行特别优惠
并能够在短时间内得到检测结果
  近年来,采用MALDI-TOF/TOF MS 进行蛋白质表达谱研究时,大多数以PMF(peptide mass fingerprinting ,肽指纹谱)的方法进行,即将蛋白质进行2D分离,采用在胶上进行酶解后分析,所获的的碎片离子的分子量信息对照数据库,进行蛋白质表达规模化鉴定。

 

血浆、体液、组织、植物、细胞培养物、细菌及真菌等样本均可适用

实验设计: MALDI-TOF/TOF MS谱分析、数据检索(可提供样本制备、蛋白质定量、2D双向电泳、图像分析、胶内酶切)

技术简介:

MALDI-TOF/TOF(基质辅助激光解析电离飞行时间质谱)

  基质辅助激光解析电离(MOLDI)是将微量蛋白质与过量的小分子基体的混合液体点到样品靶上,经加热或风吹烘干形成共结晶,放入离子源内。当激光照射到靶点上时,基体吸收了激光的能力跃迁到激发态,导致蛋白质电离和汽化,电离的结果通常是基体的质子转移到蛋白质上。然后由高电压将电离的蛋白质从离子源转送到质量分析器内,再经离子检测器和数据处理得到质谱图。TOF质量分析器被认为是与MALDI的最佳搭配,因为二者都是脉冲工作方式,在质量分析过程中离子损失很少,可以获得很高的灵敏度。

    TOF质量分析器通过计算蛋白质离子在飞行管内的飞行时间推算出蛋白质离子的m/z值。

► 对样品中较高浓度的盐、缓冲液和其它非挥发性成分有很好的抗干扰能力
► 分析灵敏度、质量准确度和分辨率高,所需要的样品量低于10-12mol,且信号强,信噪比高
► 测定质量范围广,MALDI可以使质量很大的分子离子化,TOF直接检测到几十万道尔顿的单电荷离子
► 速度快,适合于高通量分析

MASCOT 数据库检索

 Mascot是一个以使用质谱数据为依据确定蛋白质的主要序列的强大数据库搜索引擎。本实验室Mascot包括NCBI、SWISS PORT等多种蛋白质检索数据库

► 肽质量指纹谱
► 序列查询
► 二级质谱离子搜索